WWW.DOC.KNIGI-X.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Различные документы
 

Pages:     | 1 ||

«Рецензируемый научно-практический журнал Государственного научноисследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов имени ...»

-- [ Страница 2 ] --

Патогенные микобактерии туберкулеза – МБТ, вакцина ХГБ) находится на втором месте по частоте встречае БЦЖ, а также кислотоустойчивые микобактерия (КУБ) мости (1:250 000 населения). В Республике Беларусь с окружающей среды могут быть причинами тяжелой бо населением 9,47 млн. диагноз ХГБ выставлен 11 маль лезни и осложнений у пациентов с первичными имму чикам. Большинство пациентов с таким диагнозом нодефицитами. Согласно современным литературным описываются в странах с высокой осведомленностью данным, молекулярные механизмы иммунного ответа к об иммунодефицитах, а также имеющих современные микобактериальной инфекции у человека состоят из лабораторные средства диагностики иммунодефици нескольких линий защиты. тов. Проведен анализ анамнестических, клинических и лабораторных данных 9 пациентов, находящихся на Первая линия в антимикобактериальном иммунном диспансерном наблюдении с точным диагнозом Х ответе – это врожденный иммунитет, осуществляемый сцепленная хроническая гранулематозная болезнь (Х под контролем NF B сигнального пути. Дефект этого ХГБ). Возраст пациентов при постановке диагноза ко сигнального пути наблюдается при эктодермальной лебался от 1 года до 15 лет. Диагноз Х ХГБ был дисплазии с иммунодефицитом, сцепленной с Х хро установлен на основании клинических симптомов и мосомой (EDA ID – Anhidrotic (Hypohidrotic) Ectodermal иммунологических данных, а именно определение Dysplasia with Immune Deficiency). Первая линия предс «кислородного взрыва» в нейтрофилах методом про тавлена также фагоцитарным респираторным взры точной цитофлуорометрии.



Осложнение вакцинации вом, генетический дефект которого наблюдается у па живой вакциной БЦЖ в виде лимфаденитов было от циентов с хронической гранулематозной болезнью мечено у всех детей с Х ХГБ, а в двух случаях развился (ХГБ). Хроническая гранулематозная болезнь (ХГБ) – подтвержденный туберкулез, что указывает на повы врожденный иммунодефицит, причиной которого яв шенную восприимчивость пациентов с данным имму ляется генетический дефект с полным отсутствием нодефицитом к микобактериальной инфекции. На мо «кислородного взрыва» при нормальном фагоцитозе мент вакцинации у новорожденного сложно оценить во всех миелоидных клетках (нейтрофилах, эозинофи состояние иммунной системы, но важным признаком лах, моноцитах, и макрофагах). Охарактеризовано наличия иммунодефицита в семье является ранняя несколько генетических дефектов, при-водящих к раз детская смертность, а в случае Х ХГБ – наличие тубер витию ХГБ. Все они приводят к нарушению синтеза кулеза или БЦЖ осложнения у родственников ребенка субъединиц NADPH оксидазы (НАДФ H оксидаза – по материнской линии. Эти анамнестические данные никотин аденин динуклеотид фосфат оксидаза). Из следует учитывать при проведении противотуберку всех Х сцепленных первичных иммунодефицитов Х лезной вакцинации для предупреждения осложнения сцепленная хроническая гранулематозная болезнь (Х на прививку БЦЖ.

–  –  –

В настоящее время в нормативных документах на оте личьих аффинноочищенных антител соответствующей чественные комбинированные вакцины показатели специфичности и стафилококкового реагента, содер «Подлинность» и «Специфическая активность» тракту жащего белок А. При выполнении работы были опреде ются однозначно и определяются по иммуногенной ак лены следующие валидационные характеристики тест тивности в тестах «in vivo». В Европейской Фармакопее набора: специфичность, точность, прецизионность, для контроля «Подлинности» препаратов рекомендует предел обнаружения, робастность.





В процессе прове ся использовать тесты «in vitro»после десорбции ком дения валидационных исследований разработанного понентов: реакция флокуляции, методы на основе пре тест набора установлена возможность получения ре ципитации, ИФА. При этом следует отметить, что зультатов в РКОА с приемлемой точностью, прецизион преципитационные методы (радиальная иммунодиф ностью и робастностью, что позволило его использо фузия, встречный иммуноэлектрофорез, двойная им вать в дальнейших экспериментах по выявлению мунодиффузия) требуют значительного времени как на соответствующих антигенов в производственных сери подготовительные работы, так и на осуществление са ях адсорбированных препаратов (АС, АД, АДС, АДС М, мого анализа. В связи с этим разработка простых АКДС, АКДС ГепВ). Анализ более 40 серий вакцинных экспрессных методов контроля иммунобиологических препаратов показал, что РКОА позволяет достоверно препаратов является актуальной. выявлять дифтерийный, столбнячный и коклюшный Целью наших исследований была разработка тест компоненты в сорбированном виде.

набора, включающего диагностикумы для выявления Реакция коагглютинации экономична, легко выпол дифтерийного, столбнячного анатоксинов и коклюш нима и может быть рекомендована для включения в ных антигенов в реакции коагглютинации (РКОА), и нормативно техническую документацию на вакцинные оценка возможности его применения для контроля вак препараты, что позволит гармонизировать методы цин по показателю «Подлинность». контроля по показателю «Подлинность» с требования Диагностикумы были приготовлены на основе кро ми Европейской Фармакопеи.

–  –  –

Цель исследования: Изучить динамику реакций на Диас туберкулеза органов дыхания. Мальчиков было 34 че кинтест® у детей и подростков с различными формами ловека (43,6%), девочек – 44 (56,4%).

впервые выявленного туберкулеза органов дыхания в процессе комплексной противотуберкулезной терапии. В структуре клинических форм инфильтративный ту Материалы и методы: проведен анализ 78 историй беркулез составил 33,3% (26 чел.), очаговый – 29,5% болезни детей и подростков в возрасте от 4 до 17 лет с (23 чел.), туберкулез внутригрудных лимфатических уз различными формами впервые выявленного активного лов (ВГЛУ) – 37,2% (29 чел.).

го, микробиологического и рентгенологического). В Инфильтративный туберкулез легких диагностиро качестве дополнительного критерия эффективности ван у подростков в возрасте 15–17 лет, характеризо лечения применяли диаскин тест – кожную пробу с вался большим объемом поражения (более 2 сегмен Диаскинтестом® аллергеном туберкулезным рекомби тов) в 88,5% случаев, наличием распада в 73,1%, нантным в стандартном разведении. Постановку про бактериовыделением в 57,7%, в том числе с лекар бы проводили до начала лечения, через 3 и 6 месяцев ственной устойчивостью в 30,8%. Клинические симпто лечения.

мы заболевания (интоксикационный синдром умерен Результаты и обсуждения: У больных инфильтратив ной степени выраженности, легочные симптомы) ным туберкулезом средний размер инфильтрата на Ди наблюдались у каждого третьего больного (34,6%). аскинтест® до начала лечения составил 17,54±0,85 мм, Очаговый туберкулез выявлен у 16 подростков и 7 через 3 мес. лечения достоверно снизился до 15,21±0,78 детей. Среди подростков преобладали ограниченные мм (Р0,05), к 6 мес. лечения различия были еще более процессы (75,0%) в фазе инфильтрации (68,8%) с нали выраженными – 13,82±0,99 мм (Р0,01). У большинства чием распада в 12,5% и бактериовыделением в 18,8% больных (73,1%) к этим срокам отмечалась выраженная случаев. У детей отмечались исключительно «малые положительная клинико рентгенологическая динамика.

формы», диагностика которых проведена с помощью У больных очаговым туберкулезом достоверное сни компьютерной томографии. Очаги были единичными, жение реакции на Диаскинтест® отмечено к 6 мес. лече имели малые размеры (до 5 мм), преимущественно вы ния по сравнению с начальными показателями сокую плотность (у 5 чел.). Заболевание протекало ма (15,71±1,3 мм и 11,3±1,22 мм, Р0,05). По данным рент лосимптомно независимо от возраста пациентов. генологического контроля у больных очаговым туберку Туберкулез внутригрудных лимфатических узлов ди лезом отмечалась медленная положительная динамика.

агностирован у 25 детей в возрасте от 4 до 12 лет и у 4 У больных туберкулезом внутригрудных лимфатичес подростков. Процессы в 89,6% случаев были выявлены ких узлов на всем протяжении лечения средний размер в фазе неполной кальцинации с преимущественным папулы на диаскин тест сохранялся на уровне гипереги поражением 1 – 2 групп ВГЛУ (82,7%), бактериовыде ческих реакций и существенно не менялся (до лечения лителей среди этих больных не наблюдалось, симпто 18,79±1,08 мм, через 3 мес. 16,82±0,99 мм, через 6 мес.

мы интоксикации незначительной степени выражен лечения 17,12±1,06 мм). Заметной рентгенологической ности отмечались у 69,0% больных. динамики не наблюдалось, в большинстве случаев (82,7%) отмечалось торпидное течение процесса.

Лечение детей и подростков в стационаре осущес Заключение: Проба с Диаскинтестом® может быть твляли стандартными режимами химиотерапии (ХТ) сог использована в качестве дополнительного критерия ласно приказу №109 от 23.03.2003г. МЗ РФ. Коррекцию эффективности лечения у подростков с инфильтратив ХТ проводили, как правило, спустя 2 – 3 мес. от начала ным туберкулезом легких. Медленное снижение реак лечения в зависимости от клинико рентгенологической ции на Диаскинтест® при очаговом туберкулезе и отсу динамики, лекарственной переносимости и резистент тствие динамики при туберкулезе внутригрудных ности МБТ к противотуберкулезным препаратам. лимфатических узлов, вероятнее всего, обусловлены Эффективность лечения оценивали с использова характером тканевых защитных реакций при данных нием традиционных методов (клинико лабораторно формах туберкулеза.

–  –  –

Достижения иммунофармакологии последних лет догенных медиаторов иммуногенеза, способных ре позволяют по новому подойти к проблеме повыше гулировать иммунную реакцию во всех ее звеньях. В ния иммуногенности антигенов, используемых при ходе проведенных исследований показана перспек создании иммунобиологических диагностических тивность применения рекомбинантного интерлейки препаратов (ИДП). Перспективным направлением в на 2 (ИЛ 2) человека для повышения иммуногенных этой области является использование препаратов эн свойств биоантигенов, используемых в технологии

Ноябрь 2010 г.

изготовления иммунобиологических диагностичес Установлено, что использование Ронколейкина в ких препаратов. схеме иммунизации животных риккетсиозными антиге В работе использовали рекомбинантный ИЛ 2 че нами (Ку лихорадки и клещевого сыпного тифа Север ловека – препарат «Ронколейкин» производства ООО ной Азии) с целью получения гипериммунных сыворо «Биотех» (Санкт Петербург), являющийся полным ток позволило повысить их титр как минимум в 4 раза структурным и функциональным аналогом эндоген по сравнению с сыворотками крови, полученными от ного ИЛ 2. В качестве животных продуцентов гипе животных, иммунизация которых проходила без цито риммунных сывороток, – основного реагентного ком кинового препарата.

понента в технологии создания специфических Полученные результаты подтверждают наличие у ре флюоресцирующих иммуноглобулинов, использова комбинантного ИЛ 2 человека адъювантных свойств и ли кроликов породы «Шиншилла» массой 2,5 – 3 кг, свидетельствуют о целесообразности его включения в полученных из питомника «Рапполово» РАМН и про технологическую цепь получения ИДП на основе флюо шедших десятидневный карантин перед включением ресцирующих иммуноглобулинов для диагностики ин в эксперимент. фекционных заболеваний риккетсиозной природы.

–  –  –

Выявление специфических иммуноглобулинов класса Россия). Было исследовано 112 образцов сыворотки М к вирусу Крымской Конго геморрагической лихорад крови, в которые вошли 16 образцов сыворотки крови ки (ККГЛ) является стандартным тестом для быстрой здоровых доноров, 41 образец сыворотки крови боль лабораторной диагностики данного заболевания. Вы ных ККГЛ, содержащих IgМ к вирусу ККГЛ, 8 образцов явление IgМ в основном, основанное на непрямом ме сыворотки крови больных гепатитами, 15 образцов сы тоде иммуноферментного анализа (ИФА), требует вве воротки крови больных лихорадкой Западного Нила, 16 дения в схему анализа дополнительных этапов по образцов сыворотки крови больных клещевым энцефа удалению ревматоидного фактора класса М для того, литом, 5 образцов сыворотки крови больных красну чтобы избежать ложноположительных результатов. Ис хой, 11 образцов сыворотки крови больных с лихорад пользование метода, основанного на принципе «захва кой неясной этиологии.

та» IgМ, дает возможность повысить специфичность и В проведенных исследованиях было показано, что чувствительность проводимого ИФА. результаты, полученные с использованием набора ЗАО В ЗАО «Вектор Бест» разработан набор реагентов «Вектор Бест», практически полностью совпадают с для иммуноферментного выявления иммуноглобули данными набора сравнения производства ГУ НИИ Ви нов класса М к вирусу ККГЛ (анти ККГЛ IgМ) в сыворот русологии им Д.И. Ивановского РАМН.

ке и плазме крови «ВектоКрым КГЛ IgМ», основанный Набор реагентов «ВектоКрым КГЛ IgМ» прошел тех на методе «захвата». нические и медицинские испытания. ЗАО «Вектор В экспериментах сравнивали чувствительность и Бест» получено регистрационное удостоверение специфичность наборов для определения анти ККГЛ №ФСР 2010/07325 на право производства, продажи и IgМ разных производителей (ГУ НИИ Вирусологии им применения этого набора на территории Российской Д.И. Ивановского РАМН, Россия; ЗАО «Вектор Бест», Федерации.

–  –  –

Для проведения внутрилабораторного контроля каче висит принятие решения о результатах анализов. Все ства (ВКК) неколичественных методов предлагается последующие значения ОП крит должны укладываться ввести оценку чувствительности и специфичности ана в установленные пределы ОП крит.

лиза в лаборатории с помощью двух новых контроль Для оценки сходимости результатов, построения ных образцов КО2 и КО3. Для оценки чувствительности контрольной карты и текущего оперативного контроля анализа в лаборатории применяется контрольный об используется положительный контрольный образец разец КО2 (МИНИпол, ЗАО «Вектор Бест») с истинно КО1 (например, ВЛК HBsAg, ЗАО «Вектор Бест»), при положительным результатом, значение которого пре этом значение его ОП находится в области линейной вышает ОП крит, но при этом является достаточно низ зависимости ОП от концентрации маркера (примерно ким (выше ОП крит и ниже 2х ОП крит). Для оценки спе от 0,5 о. е. до 1,5 о. е.).

цифичности анализа в лаборатории применяется ВКК неколичественных методов предлагается контрольный образец КО3 (ОДС, ЗАО «Вектор Бест») с проводить в виде трех последовательных стадий с истинно отрицательным результатом, значение ОП ко оценкой внутрисерийной сходимости результатов торого должно быть ниже ОП крит. измерений; оценкой чувствительности и специфич ности анализа в лаборатории, ОП крит, межсерийной Для повышения надежности контроля качества на сходимости результатов измерений; проведением основании измерений в 20 ти аналитических сериях оперативного контроля качества в каждой аналити предлагается установить контрольные пределы разб ческой серии с помощью контрольных образцов КО1, роса значений ОП крит (ОП крит ср ± 3S), от которых за КО2 и КО3.

–  –  –

Оценка качества выполнения молекулярно биологичес В настоящее время в рамках ФСВОК функционируют ких методов лабораторной диагностики в Федеральной 9 разделов, позволяющих оценить качество исследова системе внешней оценки качества клинических лабора ний выявления и количественной оценки нуклеиновых торных исследований (ФСВОК) начата в 2000 г. кислот различных патогенов, число участников каждого

Ноябрь 2010 г.

из разделов в 2010 г. указано в скобках: «ПЦР выявле В 2010 г. в ФСВОК впервые в стране организованы ние ВГС» (125), «ПЦР выявление ВГВ» (115), «ПЦР вы разделы для количественного определения РНК ВГС и явление ВИЧ» (90), «ПЦР выявление Chlamidia ДНК ВГВ с использованием ПЦР. ВОК определения ви trachomatis, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum русной нагрузки с 2007 г. проводится и в организован (260)», «ПЦР выявление Neisseria gonorrhoeae» (90), ном разделе «ПЦР выявление ВИЧ», участники которо «ПЦР выявление микобактерий туберкулеза» (25), го могут представлять результаты исследования в «ПЦР выявление ВПЧ» (90), «Количественное опреде количественном и/или качественном вариантах. При ление РНК ВГС методом ПЦР» (90), «Количественное ВОК результатов количественных разделов рассчиты определение ДНК ВГВ методом ПЦР» (65). вают диапазон удовлетворительных результатов – ин Оценка качества ПЦР исследований проводится тервал, включающий в себя 90% результатов всех ФСВОК на основании полученных от лабораторий участ участников ЦЗ±1,64s, где ЦЗ – среднее геометричес ников результатов исследования наборов контрольных кое значение результатов участников, использовавших образцов (КО), содержащих закодированные положи определенный набор реагентов, s – стандартное откло тельные и отрицательные пробы. Состав наборов еже нение величины ЦЗ в логарифмической шкале.

годно утверждается экспертной группой ФСВОК. Анализ сведений об использованных в ходе работы

В ходе внешней оценки качества (ВОК) качественных методах, реактивах и оборудовании показал:

(неколичественных) исследований правильными счита 1. лаборатории участники ФСВОК используют для ют положительные результаты, полученные при иссле ПЦР исследований преимущественно реактивы оте довании образцов, содержащих РНК или ДНК соответ чественного производства;

ствующих патогенов и отрицательные результаты, 2. среди методов детекции продуктов амплификации, полученные при исследовании образцов, их не содер применяемых участниками ФСВОК в 2010 г., наиме жащих. В тезисах изложены данные по двум из пере нее используемым следует считать метод электрофо численных выше разделов ФСВОК. реза. Так, только 11% участников раздела «ПЦР выяв ление ВГС» использовали названный метод, Доля правильных ответов в разделе «ПЦР выявление остальные – преимущественно методы амплификации ВГС» в 200 – 2010 гг. (1 й цикл) составила соответствен в присутствии флуоресцентно меченых зондов с де но для концентрации 104 МЕ/мл 98%–97%; 103 МЕ/мл текцией сигнала в режиме реального времени (RT 95%–92%; 9х102 МЕ/мл 75% – 88%; отрицательных КО PCR) – 62% или по конечной точке (end point) – 25%.

96% – 98%. Доля правильных ответов при выявлении При использовании ПЦР для выявления ДНК Chlamidia ДНК C. trachomatis соответственно: 104 копий/мл trachomatis метод электрофореза применяли для де 94%–92%; 103 копий/мл 82–73%; отрицательных КО текции продуктов амплификации 22% участников 97% – 99%. ФСВОК, методы RT PCR и end point – 42 и 36%, соот Полученные результаты позволяют отметить, что до ветственно. Во всех разделах, за исключением «ПЦР ля правильных результатов снижается при уменьшении выявление ВИЧ», более 90% участников использовали концентрации ДНК или РНК в образце. реагенты отечественных производителей.

–  –  –

Целью работы является анализ методических аспектов радки – вирус Хунин. За чувствительность того или ино определения чувствительности амплификационных на го метода обычно принимают минимальное количество боров реагентов, предназначенных для выявления РНК концентрацию возбудителя, которое можно выявить с вирусов методом обратной транскрипции – полиме помощью данного метода.

разной цепной реакцией (ОТ ПЦР). Проведенный ана На практике для определения чувствительности ме лиз основывается на результатах, полученных при ис тода используют формулу: S = АхР, пытании ОТ – ПЦР набора реагентов для выявления где: S – чувствительность метода выраженная в РНК возбудителя Аргентинской геморрагической лихо УЕ·мл–1, А – концентрация возбудителя в препарате,

–  –  –

В настоящее время во многих КДЛ традиционно при сравнении с контролем. В результате отрицательные меняют 6% перекись водорода или хлорсодержащие сыворотки определяются как слабоположительные дезинфектанты, хотя в ряде опубликованных работ (снижение специфичности). При попадании микроко доказано, что растворы и пары этих веществ оказы личеств перекиси в рабочие растворы конъюгата и хро вают значительное негативное влияние на результа могена ОП положительных сывороток – снижалась.

ты исследований методом иммуноферментного ана Вследствие этого были получены ложноотрицательные лиза (ИФА). результаты для большей части положительных образ Цель настоящей работы – изучение влияния дезин цов (снижение чувствительности). Полученные нами фектантов различных типов на результаты ИФА с ис данные показали, что внесение микроколичеств 70% пользованием модельных экспериментов и выбор оп этанола и современных дезинфектантов в рабочем тимальных методов и средств дезинфекции в КЛД. разведении в растворы конъюгата или хромогена, так Материалы и методы. Исследования проводили на же как и инкубация планшета в присутствии их паров, коммерческих наборах реагентов «Бест анти ВГС», не оказывало существенного влияния на качество ана (ЗАО «Вектор Бест», Новосибирск), предназначенных лиза образцов сыворотки крови.

для выявления иммуноглобулинов классов G и M к ви Таким образом, экспериментально подтверждено, русу гепатита С. В экспериментах использовали дезин что использование в лаборатории перекиси водорода фицирующие средства отечественного и зарубежного или хлорсодержащих дезинфицирующих средств при производства. Анализировались образцы сыворотки водит к получению искаженных результатов ИФА за крови доноров, а также сыворотки, содержащие анти счет негативного влияния на его чувствительность и тела к ВГС. специфичность. Оптимальным для обработки в течение Результаты исследований. Пары перекиси водорода рабочего дня является 70% этиловый спирт, а для обез и хлора вызывают увеличение оптической плотности зараживания отходов, проведения плановых и гене (ОП) отрицательных образцов сыворотки крови, вели ральных уборок помещений – дезинфектантов на осно чина ОП положительных сывороток – снижается, в ве ЧАС и их комбинаций со спиртами.

–  –  –

К ВОПРОСУ ПО КОНСТРУИРОВАНИЮ

КОМПЛЕКСНЫХ ПРОБИОТИКОВ

Чупринина Р.П., Евлашкина В.Ф., Ладыгина А.В.

ФГБУ «ГИСК им. Л.А. Тарасевича» Минздравсоцразвития России, г. Москва Известно, что при совместном культивировании раз высилась и была одинаковой с бифидобакте риями ных штаммов одного или нескольких видов микроорга (МИК – 128 мкг/мл). Этот факт свидетельствует о необ низмов культуры оказывают взаимовлияние друг на ходимости изучения чувствительности штаммов, вхо друга, усиливая или ослабляя продукцию биологически дящих в состав комплексных препаратов, к антибиоти активных веществ. Исследование биологических кам раздельно в моно и смешанной популяции.

свойств бификола, созданного на основе двух таксоно мически отдаленных микроорганизмов, позволило ус При оценке показателя активности кислотообразо тановить сложный механизм взаимодействия бифидо вания B. bifidum I и E. coli М 17 в моно и смешанной по бактерий –.bifidum шт. № 1 и кишечной палочки – E.coli пуляции установлено, что при росте бифидобактерий M 17 при их совместном выращивании. показатель кислотности, выраженный в градусах Тер В опытах по изучению биосовместимости установле нера колебался в пределах от 90 до 150 оТ, при росте но, что бифидобактерии и продукты их метаболизма уг кишечной палочки, независимо от засеянных концент нетают рост кишечной палочки, в то время как кишечная раций, – не выше 75 оТ. Совместное культивирование полочка и продукты ее жизнедеятельности стимулируют двух штаммов существенно не отражалось на показате рост бифидобактерий. Накопление биомассы коли и ле кислотности, что свидетельствует о выработке мета бифидобактерий зависит от концентрации посевной болитов разной природы. Несколько другая картина дозы, физиологического состояния культур в посевном наблюдалась при оценке активности кислотообразова материале, состава и рН питательной среды и др., что ния разных штаммов L. acidophilus в моно и смешан может отразиться на количественном соотношении жи ной культуре. Моноштаммы различались по этому по вых и мертвых клеток обоих штаммов в препарате и соз казателю, однако в смешанной популяции показатель дать условия получения нестандартного комплексного кислотности был усредненным и, как правило, ниже са препарата. Такая ситуация наблюдалась в конце 80 х гг. мого высокого из них. Этот факт также следует учиты Только разработанный В.Ф. Евлашкиной адекватный вать при разработке комплексных препаратов.

метод лабораторного контроля количественного содер жания бифидо и колибактерий в дозе препарата позво При оценке антагонистической активности B. bifidum лил производителям усовершенствовать технологию I и E.coli M 17 в моно и смешанной популяции было вы изготовления бификола, повысить стандартность и ка явлено, что проявление данного свойства зависит от чество препарата. состава питательных сред, температуры культивирова ния, содержания кислорода в системе и др. Исходя из При изучении чувствительности штаммов B. bifidum I этого, при разработке комплексных препаратов и ис и E. coli M 17 к антибиотикам обнаружено, что штаммы пытании их антагонистической активности следует учи по разному характеризовались по этому показателю. В тывать оптимальные условия культивирования каждого составе бификола после совместного их культивирова микроорганизма in vitro и проводить изучение этого по ния чувствительность к тем же антибиотикам менялась. казателя в препарате в сравнении с монокультурами, Так, в монокультурах штамм E. coli M 17 был чувствите входящими в их состав.

лен к канамицину (МИК – 8 мкг/мл), а штамм B.bifidum I Сложный механизм взаимодействия разных культур наоборот устойчив к нему (МИК – 226 мкг/мл). В сме в смешанной популяции диктует необходимость оценки шанной популяции бификола после совместного их безопасности комплексных препаратов в сравнении с культивирования устойчивость кишечной палочки по безопасностью монокультур, входящих в их состав.

–  –  –

Дисбиотические состояния, связанные с негативными При исследовании антагонистической активности ли изменениями состава микрофлоры различных биото некса и бифиформа, доминирующих на отечественном пов макроорганизма, играют существенную роль в па фармрынке пробиотиков, был апробирован тест ингиби тогенезе многих заболеваний человека. Из препаратов рования биолюминесценции контрольного штамма.

для коррекции микробиоценозов в настоящее время Данный тест отличается экспрессностью, учитывает предпочтение отдается поликомпонентным пробиоти влияние концентрации клеток в препарате и исключает кам (симбиотикам), содержащим бактериальные ком питательные субстраты. С помощью люминометра фик позиции из штаммов различной таксономической при сируется снижение интенсивности свечения тест штам надлежности. Их ингибирующее действие в отношении ма при совместной экспозиции с испытуемым препара патогенной и условно патогенной микрофлоры являет том. При этом определяется активность пробиотика в ся важной характеристикой качества данных лекар конкретном состоянии, а не потенциал производствен ственных средств. Однако, с помощью общепринятых ной культуры в ходе или после выращивания.

культуральных методов, основанных на применении Полученные результаты свидетельствуют об относи питательных сред – субстрата для взаимодействия кле тельно близких параметрах антагонистической актив ток, адекватно оценить антагонистическую активность ности обоих препаратов при некотором превосходстве поликомпонентного препарата, в отличие от монопро бифиформа. Следует отметить, что отечественные мо биотика, достаточно сложно. В этом случае необходи нопробиотики (лактобактерин и ацилакт) более активно мы другие подходы выявления сочетанного метаболит подавляют свечение контрольного штамма по сравне ного воздействия всех штаммов на тест объекты. нию с исследуемыми зарубежными препаратами.

Особую актуальность данная проблема приобретает Таким образом, тест ингибирования биолюминес при разработке новых вариантов симбиотиков, качест ценции может быть использован для получения адек венные характеристики которых следует сопоставлять ватной сравнительной оценки антагонистических с известными параметрами выпускаемых аналогов. свойств поликомпонентных пробиотиков.

–  –  –

Бифидо и лактобактерии являются наиболее часто оп ременном обществе. В связи с этим, постоянно растет ределяемыми представителями нормальной микрофло выпуск различных отечественных лекарственных пре ры человека, что обуславливает их широкое применение, паратов, содержащих в своем составе живые бифидо в качестве основных компонентов пробиотических лекар и лактобактерии, как в нашей стране, а также увеличи ственных препаратов. Пробиотические бактерии имеют вается импорт зарубежных пробиотиков, в том числе большое количество функций, направленных на поддер содержащих не только пробиотические бактерии, но и жание здоровья человека. Интерес к пробиотикам посто условно патогенные микроорганизмы. До сих пор для янно растет, что свидетельствует об эффективности дан контроля качества пробиотических препаратов в нашей ных препаратов в лечении ряда заболеваний, в том числе стране широко используется бактериологический ме и инфекционных в качестве альтернативы антибиотикам. тод и бактериоскопический анализ. Эти процедуры до вольно трудоемки и субъективны. Кроме того, особую Нарушения нормальной микрофлоры и связанные с сложность представляет количественное определение этим заболевания достаточно распространены в сов пробиотических бактерий в препаратах, где присут

Ноябрь 2010 г.

ствует несколько видов бифидо и лактобактерий, что меры, направляющие синтез определенного фраг затрудняет выход таких препаратов на рынок. В насто мента ДНК для каждого вида бактерии, входящей в ящее время во всем мире все большую популярность состав смеси. Данная методика разработана с целью приобретают методы молекулярной биологии – напри контроля параметров качества, а именно определе мер, метод полимеразно цепной реакции (ПЦР). ния качественного и количественного состава живых пробиотических бактерий в новых целевых сорбиро С использованием метода ПЦР нами была разра ванных пробиотиках.

ботана методика качественного и количественного Для количественного определения живых пробиоти анализа поливидовой смеси, содержащей три вида ческих бактерий нами разработан метод с использова бифидобактерий (B.

bifidum, B. longum и B. нием стандартного десятикратного разведения анали adolescentis) и два вида лактобактерий (L. plantarum, зируемого образца с последующим высевом на плотную L. acidophilus). Для решения данной задачи нами бы питательную среду. Видовая принадлежность выросших ли разработаны оригинальные специфические прай колоний определялась ПЦР идентификацией.

–  –  –

Бактериоцины, своеобразная группа антибактериаль ностью. На скрининг новых штаммов – продуцентов ных биологически активных веществ микробного про бактериоцинов и выявление их прикладного потенциа исхождения, являются в настоящее время объектом ла (пробиотики, анибактериальные средства консер детального изучения во многих странах. Исследования ванты биопрепаратов, пищевых продуктов и др.) ассо сосредоточены на свойствах новых бактериоцинов, вы циированным коллективам ученых из стран Евросоюза деленных у микроорганизмов разных таксономических оказывается мощная финансовая поддержка.

групп (физико химическая характеристика, спектр ан тибактериального действия, механизмы взаимодей В 80 х гг. прошлого века сотрудниками НИИВС им.

ствия с микробной клеткой и макроорганизмом, воз И.И. Мечникова на основе бактериоцина создан пер можности практического применения и т. д.). Как вый отечественный коммерческий препарат «томицид»

правило, изучение сопровождается определением мо [Блинкова Л.П. и др., 1985]. В настоящее время прове лекулярно генетических особенностей штаммов про ден анализ выделенных клинических штаммов, а также дуцентов. На основании полученных результатов про культур из окружающей среды на способность проду водится классификация вещества. Отметим, что цировать бактериоцинподобные субстанции. Показа система международной классификации бактериоци но, что частота встречаемости признака варьирует от нов несовершенна, ее продолжают уточнять и допол 52 до 60%. Некоторые из родов синтезировали веще нять, так же, как и основные критерии принадлежности ство не менее чем в 90% случаев [Блинкова Л.П., Гор бактериальной субстанции к группе бактериоцинов. батко Е.С. и др., 2008]. Обнаружены бактериоциноген Особый интерес вызывают пептидсодержащие бакте ные штаммы, которые предполагается тестировать на риоцины, как правило, имеющие широкий спектр возможность использования в качестве пробиотиков действия и обладающие регуляторным влиянием на или консервантов. Следует заключить, что скрининг но макроорганизм. Установлено, что как пробиотические вых безопасных штаммов продуцентов и получение со штаммы, так и многие из изученных клинических куль ответствующих бактериоцинов является весьма акту тур обладают бактериоцинпродуцирующей актив альным и перспективным.

–  –  –

Реакция организма на инфекционный агент характери с тяжестью течения подобных состояний и с целью как зуется развитием системного острофазного ответа, можно более раннего начала их терапии лабораторная следствием которого, как правило, является активация диагностика бактериемий в части касающейся выявле условно патогенной микрофлоры, оказывающей нега ния бактероидов, должна основываться на методах тивное влияние на функционирование органов и систем экспресс диагностики. Перспективным представляется макроорганизма. Одними из наиболее ярких представи исследование лейкослоя периферической крови пря телей последней являются неклостридиальные анаэро мым методом флюоресцирующих антител. При обсле бы, входящие в семейство Bacteroidaceae, прежде всего – довании 82 больных с хирургической патологией ЛОР Bacteroides fragilis, обусловливающие развитие до 96 – органов, ЦНС, сердечно сосудистой и мочеполовой 100% гнойно септических инфекций. Особую важность систем бактероиды выявляли примерно в 50% случаев, имеет наличие у этих микроорганизмов капсулы, предо это сопровождалось развитием у них повышенного твращающей воздействие фагоцитов и гуморальных тромбообразования, несмотря на использование мас бактерицидных факторов организма хозяина, и способ сивных доз антикоагулянтов, а также гангренозных обра ность продуцировать биотоксин флагилизин, оказываю зований в местах скопления мелких капилляров. Прово щий повреждающее действие на эпителиальные клетки димое комплексное лечение с применением препаратов организма, а также сходный по строению с некоторыми направленного действия против B. fragilis способствова бактериальными токсинами и змеиными ядами. ло улучшению клинической картины заболевания и пол В последнее время бактероиды с большой частотой ному в дальнейшем выздоровлению пациентов.

выделяют при инфекции кровотока, которая возникает Представляется целесообразным при бактериемии при отсутствии очагов инфекции на момент взятия крови неясной этиологии проводить таким больным на посев (первичная инфекция) или при наличии очага экспресс исследования крови на бактероиды и вклю инфекции другой локализации вследствие воздействия чение в комплексную терапию препаратов направлен того же микроорганизма (вторичная инфекция). В связи ного действия против данных возбудителей.

–  –  –

Литиказа (Lyticase) – фермент, продуцируемый (ПЭМ) JEM – 100 C (производства Японии, 1975 г.). Ус Micrococcus luteus, используется в генной инженерии тановлено, что после обработки литиказой (10 ЕД) в те как реагент, разрушающий клеточную стенку дрожже чение одного часа маннопротеиновый слой клеточной подобных грибов (ДПГ) и индуцирующий их превраще стенки Candida albicans заметно истончается за счет ние в сферопласты. Вопрос о возможности применения разрыва связей маннана, однако глюкановый и хитино литиказы в лечебных целях в настоящее время является вый слои остаются без изменений. В некоторых местах открытым. В проведенном ранее исследовании нами происходит разрыв всей клеточной стенки. В опыте вок установлено, что литиказа обладает антимикотической руг клеток ДПГ видна зона просветления среды, а фиб активностью в отношении клинического штамма риллярный слой отсутствует полностью, хотя в контроле Candida albicans (подавление жизнеспособности ДПГ, он четко обозначен. Разрушение маннопротеинового блокирование адгезии на вагинальном эпителии, нару комплекса вызывает деструкцию скелетона клетки ДПГ, шение морфогенеза, индукция фагоцитоза макрофага выход ее содержимого в результате лизиса органелл.

ми). Представлялось необходимым изучить с помощью Таким образом, действие литиказы приводит к гибели электронной микроскопии структурные изменения кле или изменению структуры клеточной стенки ДПГ, а значит и точной стенки ДПГ под действием литиказы. её свойств. Можно предположить, что эти преобразования Электронно микроскопические исследования прово коснутся и изменения проницаемости клеточной стенки дили на просвечивающем электронном микроскопе Candida albicans для современных лекарственных средств.

–  –  –

В последние годы для лечения и профилактики респи В ЗАО «Вектор БиАльгам» в ходе 10 летних иссле раторных заболеваний стали применять иммунокор дований были разработаны рецептуры и технологии ректоры бактериального происхождения, вызывающие ферментативых лизатов пробиотических микроорга формирование селективного иммунного ответа против низмов «Бифи Лиз» и «Лакто Лиз». Основным досто конкретного возбудителя. Среди наиболее изученных инством препаратов является их форма выпуска в ви препаратов следует выделить биостим, ибуфрен, им де раствора. Такая форма обладает наибольшей мунал, имуофан, ИРС 19, миелопид. Эти препараты биологической ценностью. «Бифи Лиз» и «Лакто вызывают выработку специфических антител к тем Лиз» относятся к группе иммуномодуляторов, стиму микробам, лизаты которых входят в состав препарата. лирующих неспецифическую резистентность орга Лизис бактерий приводит к исчезновению некоторых низма. Их основу его составляет лизат клеточной антигенных фракций (в частности – рибосом), чем и стенки молочнокислых бактерий и бифидобактерий, объясняется их слабая и нестойкая активность. Поэто представляющий собой мелкие фрагменты клеточ му сегодня актуальны мероприятия по разработке и ной стенки микроорганизмов (пептидогликаны), внедрению альтернативных препаратов, действие ко безвредные для организма человека, так как они яв торых направлено на создание неспецифического им ляются метаболитами нормальной микрофлоры ки мунитета к широкому спектру возбудителей. шечника.

В иммунологии только начинается активное приме Лизаты «Бифи Лиз» и «Лакто Лиз» восстанавлива нение лизатов бифидо и лактобактерий, которые ют иммунные реакции за счет активации макрофагов представляют собой бесклеточный экстракт, образую и моноцитов, усиливая их цитотоксические свойства щийся после лизиса бактериальных клеток различными по отношению к вирусам, бактериям и опухолевым способами. Их особенностью является способность клеткам. При этом усиливается синтез цитокинов, повышать противоинфекционную защиту и снижать что ведет к стимуляции клеточного и гуморального сенсибилизацию организма. иммунитета.

–  –  –

Препараты крови являются эффективными лечебны Вирусная безопасность препаратов крови, прежде ми средствами и широко применяются в медицинской всего, обеспечивается качественным тестированием практике. Обеспечение вирусной безопасности препа крови доноров на наличие маркеров гемотрансмиссив ратов крови является актуальной проблемой совре ных инфекций. Каждая порция плазмы получается из кро менной медицины. Качество и вирусная безопасность ви потенциально здоровых доноров и контролируется на плазмы, как сырья для изготовления препаратов крови, отсутствие поверхностного антигена гепатита В (НВsАg), обеспечивается медицинским обследованием и лабо на отсутствие антител к вирусу гепатита С и антител к ви раторным контролем донора и плазмы в процессе её русу иммунодефицита человека (ВИЧ 1, ВИЧ 2), отсут заготовки в учреждениях службы крови. ствие антител к возбудителю сифилиса и бруцеллеза.

Плазма, объединенная при производстве препара В Республике Узбекистан с учетом опыта других тов крови в первый гомогенный пул, контролируется на стран по контролю вирусной безопасности готовых ле соответствие требованиям ВФС 42Уз 1016 2007 карственных форм препаратов крови, согласно реше «Плазма для фракционирования» и тестируется на от ния Экспертного Совета Главного Управления по конт сутствие поверхностного антигена гепатита В (НВsАg), ролю качества лекарственных средств и медицинской на отсутствие антител к вирусу гепатита С и антител к техники МЗ РУз, проводится контроль на наличие пове вирусу иммунодефицита человека (ВИЧ 1, ВИЧ 2). рхностного антигена вируса гепатита В (НВsАg), анти Тест системы, используемые для индикации мар тел к вирусу гепатита С и антител к ВИЧ 1 и ВИЧ 2 ИФА керов вирусов, должны быть высокочувствительны, методом во всех препаратах крови, поступающих на специфичны и разрешены для применения в практи регистрацию и сертификацию. При выявлении марке ческой медицине. При выявлении положительных об ров гемотрансмиссивных инфекций в препаратах кро разцов плазмы на маркеры вирусных инфекций плаз ви, результаты подтверждаются иммуноблотом или ма бракуется. другими подтверждающими тестами.

–  –  –

Целью исследования являлось изучение стабильности но получено три экспериментальные серии препарата им вого препарата иммуноглобулина человека против клеще муноглобулина человека для внутривенного введения с вого энцефалита (КЭ) для внутривенного введения (ВВИГ). концентрацией белка в растворе 5%; прозрачностью За основу технологии был взят способ получения менее 0,01; цветностью менее 0,02; электрофоретичес ВВИГ методом ультра и диафильтрации фракции III по кой чистотой более 97%; антикомплементарной актив Кону при кислом значении рН и низкой ионной силе ностью не более 1,0 CH50/мг; содержащий менее 1% раствора. Этот метод позволяет получить препарат с агрегатов и фрагментов. Титр антител к вирусу КЭ в допустимым уровнем антикомплементарной активнос РТГА составлял не менее 1/160. Остаточное содержа ти, содержащий нативные молекулы IgG, однако, спо ние вирусинактивирующих агентов соответствовало ре соб не отвечает современным стандартам вирусной комендациям ВОЗ. Полученный препарат был стерилен, безопасности препаратов крови. Разработанная нами нетоксичен, апирогенен. Препарат сохранял свои свой технология предусматривает проведение вирусной ства в течение пятнадцати месяцев хранения при тем инактивации препарата на этапах сольвент детергент пературе от 2 до 8 °С (срок наблюдения). Полученные ной обработки и инкубации при низком значении рН. данные позволяют признать препарат стабильным в те С применением данной технологической схемы было чение срока годности (1 год).

–  –  –

Разработана технология получения специфического парата – научно исследовательский, доклинического иммуноглобулина (ИГ) против цитомегаловируса для изучения специфической нейтрализующей активности внутривенного введения. Этапы получения ИГ включа в ГНЦ «Вектор» (Новосибирск), согласования програм ли все стандартные операции выделения специфичес мы клинических испытаний.

кого ИГ от стадии сбора сырья до получения экспери Препарат антицитомегаловирусного ИГ для внутри ментально производственных серий препарата. венного введения эквивалентен по специфической ак Закончены следующие этапы разработки нового пре тивности, но отличается от зарубежного «Цитотект»

Ноябрь 2010 г.

(Biotest, Германия) улучшенными показателями авид мальных ИГ по титрам антител к цитомегаловирусу, что ности, более низким содержанием агрегатов, димеров, является обязательным при регистрации и перереги а также низкой ценой. страции препаратов ИГ.

Стандартизация активности осуществлена по перво Контроль специфической активности разработанно му отечественному отраслевому стандартному образцу го ИГ против цитомегаловируса и отбор сырья прово (ОСО) антицитомегаловирусных антител с использова дится иммуноферментным методом с использованием нием метода параллельных линий (Петухов В.

Г., ГИСК тест системы «ДС ИФА АНТИ ЦМВ IgG» (НПО «Диаг им. Л.А. Тарасевича) в соответствии с требованиями ностические системы», г. Нижний Новгород). Это пер Европейской Фармакопеи. Определение активности в вая тест система в РФ, созданная на основе разрабо единицах активности, как и у зарегистрированного на танного ОСО, что позволяет легитимно использовать территории РФ немецкого препарата «Цитотект» («Би указанную тест систему для оценки титра специфичес отест», ФРГ), позволяет проводить испытание отечест ких антицитомегаловирусных антител в производстве венного антицитомегаловирусного ИГ в биоэквивале отечественных иммуноглобулиновых препаратов.

нтных дозах относительно зарубежного аналога. Оценка активности разработанного препарата про При разработке отечественного ОСО активности ан водится в тех же единицах, что и у препарата «Цито тицитомегаловирусного ИГ был использован в качест тект». Разработанный препарат характеризуется уров ве стандарта сравнения международный стандарт, нем антител не менее 100 РЕ/мл и индексом авидности разработанный в одной из аккредитованных лаборато не менее 75 %. По физико химическим свойствам и рий ВОЗ – институтом Пауля Эрлиха (Германия). Соз титру антител препарат не уступает или превосходит данный нами ОСО позволяет проводить оценку нор лицензированный в РФ препарат «Цитотект».

–  –  –

Среди широкого спектра иммунобиологических препа и анти В гемагглютининов», «содержание антител к по ратов иммуноглобулины человека для внутривенного верхностному антигену вируса гепатита В (HBsAg)», введения занимают одно из ведущих мест. На отечест «пирогенность».

венном рынке существует ряд внутривенных иммуног В результате проведенных исследований была лобулинов Российского и зарубежного производства. обоснована возможность включения вышеперечис Отечественные препараты выпускаются как в жидкой, ленных показателей качества в ФСП на препарат так и в лиофилизированной форме, поэтому сравни «Иммуновенин» (иммуноглобулин человека нормаль тельная характеристика показателей качества этих ный лиофилизат для приготовления раствора для форм выпуска препаратов является важной. внутривенного введения) и ФСП на «Имбиоглобулин»

Требования качественных показателей, заложенных (иммуноглобулин человека нормальный для внутри в ФСП на отечественные препараты иммуноглобулина венного введения), кроме того, заложены более человека нормального для внутривенного введения, жесткие требования по показателю пирогенности изготовленных до 2008 г. значительно отличались от (ГФ XII).

требований ЕФ на аналогичные препараты, поэтому По заявке Фармакопейного Комитета подготовлена необходимо было провести изучение отдельных пока и сдана Общая фармакопейная статья на иммуноглобу зателей качества, ранее не предусмотренных в ФСП. лины человека, в которую также включены требования, С этой целью нами были проведены исследования предусмотренные Европейской фармакопеей (ЕФ) для по показателям: «осмоляльность», «содержание анти А внутривенных иммуноглобулинов.

–  –  –

Лечебно профилактические бактериофаги входят в ар водств. Это объясняется тем, что каждый производи сенал антибактериальной терапии. Их преимущество тель имеет свою производственную коллекцию бакте перед антибиотиками в специфической направленнос риальных штаммов и маточных фагов. Обязательное ти, в том числе и в отношении антибиотикорезистентных пополнение этих коллекций осуществляется своими возбудителей гнойно воспалительных заболеваний. Эти силами на базе своего региона.

препараты содержат вирулентные фаги, активные в от Таким образом, для определения фагочувствитель ношении соответствующих им видов бактерий. Они, в ности возбудителей ГВЗ диагностическим бактериоло отличие от антибиотиков, не подавляют нормальную гическим лабораториям полезно использовать полный микрофлору и не вызывают аллергических реакций. набор моно и комбинированных бактериофагов всех Обязательное ежегодное обновление производ производителей.Поскольку ФГУП «НПО «Микроген»

ственных штаммов за счет свежевыделенных бактерий объединил в свой концерн всех производителей бакте от больных и адаптация фагов к фагоустойчивым воз риофагов (Уфимский, Пермский, Нижегородский фи будителям позволяют актуализировать их направлен лиалы) целесообразно организовать централизован ность в соответствии с современной этиологией ГВЗ. ный сбор штаммов возбудителей ГВЗ со всех регионов Нами были проведены исследования по изучению страны и объединить производственные коллекции диапазона действия препаратов бактериофагов в отно всех предприятий. Это позволит расширить диапазон шении возбудителей ГВЗ. Фагочувствительность опре активности каждого препарата и даст возможность изу деляли одномоментно со всеми образцами моно и чения таких «объединенных препаратов» с привлечени комбинированных бактериофагов. Все препараты со ем генетических и молекулярно биологических мето ответствовали требованиям НТД. Показано, что одни и дов. Тем самым препараты бактериофагов могут быть те же штаммы могут различаться по своей чувствитель охарактеризованы и стандартизованы согласно совре ности к одноименным препаратам разных произ менным требованиям.

–  –  –

В связи со вспышкой нозокомиального сальмонеллеза 61,4% больных. В 74 случаях этот же штамм обнаружен (НС) в хирургическом корпусе больницы в ноябре – де в смывах.

кабре 1994 г. была разработана и осуществляется сис За период 1995 – 1999 гг. из всех выделенных культур S.

тема активного наблюдения за сальмонеллезной ин typhimurium составила 92,0% (286). Зарегистрировано 8 фекцией. С 1995 г. каждый больной, поступающий в вспышек НС (от 3 до 17 чел.). С июля 1999 г. началось при хирургический приемный покой (ХПП), обследуется на менение сальмонеллезного бактериофага, до конца года сальмонеллез. За 10 лет (1995 – 2004 гг.) обследовано его получал каждый больной, поступающий в ХПП, далее – 67 992 пациента, культуры сальмонелл выделены у по эпидпоказаниям. Санации подлежали контактные боль 484; S. typhimurium составила 64,3%, устойчива к 17 ные, медперсонал. В 2000 – 2004 гг. культура S.

антибиотикам, биовар 1а (инозит+). В ХПП она выделе typhimurium составила всего 8,0% (25), то есть отмечено на у 35,4%, в отделениях – у 64,6%. Бактерионосители снижение в 11,4 раза; средний койкодень больного сни (354) составили 73,1%, S. typhimurium была выявлена у зился в 1,6 раза. В 2000 г. вспышки НС прекратились, а с 60,7%, в ХПП она выявлена у 38,6%, в отделениях – у 2004 г. S. typhimurium не выделялась ни в ХПП, ни в отделе

Ноябрь 2010 г.

ниях. Таким образом, подтвердилась роль S. typhimurium фага гр. ABCDE производства ДП «Биофаг» ГУП «Имму как возбудителя НС, роль бактерионосителей в формиро нопрепарат» г. Уфа. Раннее выявление культур сальмо вании и поддержании очагов НС. нелл и использование бактериофага способствовало Отмечена высокая эффективность и надежность при снижению числа осложнений у хирургических больных и менения адаптированного сальмонеллезного бактерио повышению эффективности проводимой терапии.

СВОЙСТВА ТАБЛЕТИРОВАННОГО

ПРЕПАРАТА СЕКСТАФАГ

Функнер Е.В., Ковязина Н.А., Решетников В.И., Ефимова М.Г.

Филиал ФГУП НПО «Микроген»МЗ РФ «Пермское НПО «Биомед», Пермь В настоящее время ассортимент фармацевтического кислоты в течение 1 ч, распадаются в воде за 30 мин.

рынка лекарственных препаратов бактериофагов предс Проведенные доклинические испытания по изучению тавлен в основном жидкой формой и таблетками с кис «острой», «хронической» токсичности таблеточной лотоустойчивой оболочкой. В филиале ФГУП НПО «Мик композиции не выявили разницы в массе животных в роген» «Пермское НПО «Биомед» разработаны таблетки сравниваемых группах (р0,05). Состояние животных секстафаг без оболочки. Целью настоящего исследова опытных групп не отличалось от такового в контроль ния стало изучение разработанного препарата. ных группах (Секстафаг жидкий, интактные), что сви детельствует об отсутствии симптомов интоксикации.

Материалы и методы. Литическую активность бакте Проведено макроскопическое исследование внутрен риофагов оценивали по методу Аппельмана в разведе них органов, изучена динамика массы внутренних ор ниях от 103 до 104; кислотоустойчивость таблеток опре ганов (тимус, легкие, сердце, печень, селезенка, поч деляли по модифицированной методике ГФ ХI, ки). Внутренние органы животных сохраняли все выдерживая их в 0,1 М растворе хлористоводородной характерные признаки, без признаков воспаления.

кислоты в течение 1 и 3 ч.; доклинические исследова Гистологическое изучение внутренних органов живот ния проводили на мышах, крысах, свинках, кроликах с ных (крыс) выявило, что препарат «Секстафаг» как в изучением «острой», «хронической» токсичности, ал таблетированной, так и в жидкой формах (контроль) лергенных свойств в реакциях ГНТ и ГЗТ, фармакокине не обладает токсическим действием на организм жи тики, применяя дозы таблетированного препарата: вотных. При изучении фармакокинетики независимо 10Д, 100Д, 300Д с учетом коэффициента пересчета доз от лекарственной формы, все компоненты секстафага для разных видов животных. обнаруживались в сыворотке крови, моче и кале уже после 2 ч после приёма препаратов, при этом наблю Результаты и обсуждение. Полученные таблетки дали наибольшее проявление литической активности «Секстафаг» без оболочки массой 0,16 г соответству у таблетированного препарата в сравнении с жидким ют 20 мл жидкого коммерческого фага; приятные на в 2–3 раза.

вкус; при хранении при температуре от 2 до 8 °С в те чение1,5 лет (срок наблюдения) сохраняют специфи Результаты исследований разработанных таблеток ческую активность по разным компонентам секстафа «Секстафаг» показали, что препарат нетоксичен, не вы га на уровне 10 3–10 4; не разрушаются при зывает аллергизирующих реакций и обладает большей выдерживании в 0,1 М растворе хлористоводородной биодоступностью.

–  –  –

Заболеваемость сальмонеллезами в Пермском крае за фекций установленной этиологии. Основными препара 2009 г. составила 23,6% в структуре общих кишечных ин тами этиотропной терапии при сальмонеллезах все еще являются антибиотики. Однако проблема антибиотико mission, S. africana) не превысил 9,5%. Оценка чувстви резистентности диктует поиск новых методов борьбы с тельности выделенных штаммов к антибактериальным этой инфекционной патологией. Целью исследования препаратам выявила максимальную активность цип явилось изучение биологических свойств сальмонелл, рофлоксацина – 100%, чувствительность к цефазолину циркулирующих на территории Пермского края и оценка составила 98,4%, к ампицилину и амоксиклаву по их чувствительности к антимикробным препаратам. 96,8%, гентамицину – 93,7%, левомицитину – 87,3%, Материалы и методы. Исследовано 63 культуры налидиксовой кислоте – 68,3%. Наименьшая чувстви сальмонелл, полученных из различных клинических тельность была отмечена к доксициклину – 31,8%, к фу источников г. Перми. Идентификацию микроорга радонину – 30%. Вместе с тем фагочувствительность низмов проводили по классическим методикам на штаммов сальмонелл к специфическому бактериофагу стандартных питательных средах с последующей составила 84%. Особо отметим, что группа штаммов – оценкой их чувствительности к 10 антибактериаль 18 изолятов (28,6%) были резистентны к 3 и более тес ным препаратам: ампицилину, амоксиклаву, цефазо тируемым препаратам, а фаголизабельность в этой лину, гентамицину, доксициклину, ципрофлоксаци группе составила 100%.

ну, налидиксовой кислоте, левомицетину, фурадонину. Фаголизабельность определяли по ме Выводы. Структура сальмонеллезов Пермского края тоду Аппельмана к сальмонеллезному бактериофагу представлена S. enteritidis, S. infantis, S. typhimurium, S.

производства «НПО «Биомед». dublin, S. newport, S. mission, S. africana, при этом пре Результаты и обсуждение. Видовой состав изучен обладающим видом является S. enteritidis. Высокий ных штаммов сальмонелл представлен 7 видами. До уровень фагочувствительности выделенных штаммов минирующей культурой стала S. enteritidis 84,2%, на на фоне возросшей антибиотикорезистентности обус долю S. infantis пришлось 6,3%. Удельный вес прочих лавливает необходимость использования препаратов сальмонелл (S. typhimurium, S. dublin, S. newport, S. бактериофагов при данном заболевании.

–  –  –

Во второй половине 1990 х гг. стремительный рост бирается в большей степени эмпирически, и информа числа антибиотикоустойчивых штаммов патогенных ции об их составе недостаточно для сертификации та бактерий стимулировал поиск альтернативных методов ких препаратов за пределами СНГ.

борьбы с микроорганизмами. Одним из таких методов Бактериофаги Pseudomonas aeruginosa, умерен служит фаговая терапия – использование природных ного патогена, вызывающего серьезные внутри вирусов бактерий (бактериофагов) для профилактики и больничные инфекции, достаточно хорошо изучены, лечения бактериальных инфекций. В бывшем СССР и и на основании их применимости для терапевтичес Восточной Европе этому подходу придавалось важное ких целей могут быть подразделены на несколько значение, и смеси (коктейли) бактериофагов для лече групп. Нами был разработан тест, основанный на ния инфекционных заболеваний производятся про ПЦР амплификации генов, характерных и специфи мышленно. ческих для каждой группы бактериофагов. Этот тест Научным сообществом выработан ряд принципиаль позволяет быстро и надежно определять принад ных требований к генетическим, молекулярно биологи лежность фага, содержащегося в коллекциях или ческим и иммунологическим свойствам бактериофа выделенного de novo, к определенной группе и, со гов, которые могут использоваться для лечения ответственно, применимости для лечения псевдо пациентов. Состав же промышленных препаратов под монадных инфекций.

–  –  –

Широкое применение медицинских иммунобиологи за короткий промежуток времени, удовлетворительная ческих препаратов, направленных на профилактику, ле точность, безопасность. Это обстоятельство приобре чение и диагностику инфекционных заболеваний, оп тает исключительное значение при некоторых специ ределяет повышенные требования к их эффективности альных исследованиях, где необходимы многократные и безопасности. Требования к качеству регламентиру периодические исследования одного и того же образца ются соответствующими международными правилами (изучение динамики роста и размножения культуры, как на этапах лабораторных исследований (GLP), кли действие антибиотиков и др.). В ГИСК им. Л.А. Тарасе нических испытаний (GCP), так и на этапе производства вича разработаны ОСО мутности бактерийных взвесей (GMP). Разработка и использование стандартных об 10 МЕ (ОСО 42 28 85) и 5 МЕ (ОСО 42 28 86), аттесту разцов (СО) является одним из важнейших элементов емая характеристика которых установлена в соответ системы обеспечения качества. В сфере производства ствии с утвержденным и рекомендованным Всемирной МИБП используют отраслевые стандартные образцы организацией здравоохранения Международным стан (ОСО), изготовленные или аттестованные в ГИСК им. дартным образцом мутности. Одна Международная Л.А. Тарасевича. единица мутности (1 МЕ) соответствует мутности взве Общим и принципиально важным для многих мето си коклюшных микробов с концентрацией 1,1 млрд.

дов лабораторных исследований является стандарти клеток в 1 мл.

зация суспензии микроорганизмов. Хорошо известным Важнейшим требованием к ОСО мутности является способом микробиологического количественного ана воспроизведение аттестуемой характеристики от се лиза МИБП является измерение оптической плотности рии к серии, что обеспечивается стандартизацией тех бактериальной взвеси. Наибольшее распространение нологии его изготовления и порядком аттестации.

получил метод оценки концентрации микробной сус Применение ОСО позволяет получать точные и со пензии по мутности, что обусловлено его важными поставимые результаты при производстве МИБП, стан практическими преимуществами в сравнении с други дартизации ветеринарных бактерийных препаратов, а ми количественными методами. Основными из них яв также в области экспериментальной, технической и об ляются – простота, возможность проведения анализа щей микробиологии.

СТАНДАРТИЗАЦИЯ И КОНТРОЛЬ ПРОЦЕССА

ПОЛУЧЕНИЯ СТОЛБНЯЧНОГО АНАТОКСИНА

Увицкая Л.Е., Удотов Ю.М., Увицкий А.Ю.

ОАО «Биомед», г. Москва Получение столбнячного анатоксина реакторным спо гию получения бульона и провести адаптацию к нему собом на предприятии ОАО «Биомед им. И.И. Мечни штамма Cl. tetani №471. За период с декабря 2008 г.

кова» ведется с 1967 г. В настоящее время культиви по апрель 2010 г. нами было получено 25 производ рование продуцента – Clostridium tetani – ственных серий анатоксина. Все серии соответство осуществляли на многокомпонентной питательной вали нормативным показателям и вошли в состав вак среде: казеиново растительном бульоне. В связи с цинных препаратов.

изменениями технической документации на ряд ком Дополнительную оценку качества получаемого понентов среды, в частности, на кислотный казеин, продукта и контроль управляемости процесса прово возникла необходимость стандартизовать техноло дили используя контрольные карты Шухарта, в соот ветствии с ГОСТ Р50779 42 99. В качестве базового выходящих за пределы рекомендованных нормативов критерия оценки применяли индекс соотношения ак не наблюдали. Не отмечалось ни одной из следующих тивности готового продукта в единицах связывания вариаций (Ю.П. Адлер, В.Л. Шпер, 2000):

(ЕС) к одному литру среды, использованной при 1. Точка лежит выше (ниже) верхнего контрольного культивировании. Данный показатель наиболее пол предела;

но отражает как качество питательной среды, так и 2. Из пяти последовательных точек четыре лежат выше степень адаптации штамма, позволяя оценить ста (ниже) ЦЛ более чем на одно стандартное отклонение;

бильность получаемого продукта на всех стадиях 3. Семь последовательных точек лежат выше (ниже) ЦЛ;

производства. 4. Шесть последовательных точек расположены в по Результаты анализа полученных данных показали, рядке монотонного возрастания (убывания);

что все полученные за анализируемый период серии 5. Среди десяти последовательных точек существует препарата соответствуют регламентированным пока подгруппа из восьми точек, образующая монотонно зателям специфической активности, безвредности и возрастающую (убывающую) последовательность.

стерильности. Активность серий соответствовала нор мальному распределению. Таким образом, можно сделать вывод, что процесс При обработке контрольных карт Шухарта установ производства столбнячного анатоксина носит управляе лено, что все показатели находились в пределах двух мый характер. В качестве ближайших перспектив совер стандартных отклонений от среднего значения. Конт шенствования производства препарата и повышения рольные точки были равномерно распределены отно стандартности процесса предполагается разработка по сительно центральной линии (ЦЛ); серий и трендов, лусинтетической среды для культивирования Cl. tetani.

–  –  –

Плотникова Т.В., 3Рукавишников М.Ю., 3Топычканова Н.Г., 3Кувшинова И.Н., 1Лашкевич В.А.

Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П.Чумакова РАМН;

ФГУП «Предприятие по производству бактерийных и вирусных препаратов Института полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П.Чумакова РАМН»;

Закрытое акционерное общество «Вектор-Бест», Кольцово, Новосибирская обл.

Используемая в настоящее время технология получе ляющийся при хроматографии между двумя пиками и ния вакцины против клещевого энцефалита (КЭ) вклю содержащий как высокомолекулярные, так и низкомо чает, как основной этап, хроматографию концентратов лекулярные примеси. Вирионный материал третьей вируссодержащего инактивированного формалином области фракций сходен по морфологическим пара культурального материала на широкопористых носи метрам с интактными вирионами.

телях. При этом материал концентратов распределя Для изготовления вакцины против КЭ используется ется на три области хроматографических фракций. антигенный вирионный материал первой области Фракции первого пика оптической плотности содер фракций. Антигенный материал третьей области хро жат основное количество интактных вирионных струк матографических фракций не используется в произво тур вируса КЭ и примеси, сопоставимые по размеру с дстве вакцины, поскольку он содержит вирионный ан вирионами, а также превышающие их по этому пара тиген в низких концентрациях и количество примесей в метру. Фракции второго пика оптической плотности этом материале весьма высоко.

содержат, в основном, низкомолекулярные примеси Для получения концентрированных и высокоочи невирусного характера. Третья область фракций щенных вирионных препаратов из материала треть представляет собой вирионный материал, распреде ей области фракций оказалось существенным, что

Ноябрь 2010 г.

основное количество высокомолекулярных приме высокоочищенные (соотношение белка Е и суммар сей исходного концентрата хроматографируется во ного белка в диапазоне от 1,2 до 5 – 6) препараты фракциях первого пика. Использование широко вирионов вируса КЭ.

распространённого метода очистки вирусов ульт Данные препараты показали хорошую стабильность рацентрифугированием и специфичного для флави и антигенные свойства, что позволяет использовать их вирусов метода очистки барьерным электрофоре в производстве иммуноферментных наборов реаген зом по отдельности и в сочетании позволяет тов для диагностики клещевого энцефалита: «ВектоВ получать концентрированные (50 – 500 мкг/мл) и КЭ антиген», «ВектоВКЭ IgG» и «ВектоВКЭ I.

ДЛЯ ЗАМЕТОК

–  –  –

ДЛЯ ЗАМЕТОК



Pages:     | 1 ||
Похожие работы:

«Стандартные меры предосторожности при работе с кровью, другими жидкостями организма, органами, тканями. Зубавичене Н.М., к.б.н.,с.н.с. Профессиональный риск инфицирования существует • у медицинских работников (персонала государственных и негосударственных медицинских учреждений, в том числе лаборатор...»

«А.В. Гарманов Практика оптимизации соотношения сигнал/помеха при подключении АЦП в реальных условиях. Редакция от 03.03.2010 г.1. Введение. Как это обычно бывает? Подключили АЦП в реальных условиях к реальным источникам сигналов, следуя общим рекомендациям р...»

«Гукалов Владимир Николаевич ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ В ЧЕРНОЗЕМАХ ЮЖНО-ЕВРОПЕЙСКОЙ ГРУППЫ СТЕПНОЙ ПОЧВЕННОБИОКЛИМАТИЧЕСКОЙ ОБЛАСТИ В СИСТЕМЕ АГРОЛАНДШАФТА Специальность: 03.02.13 – почвоведение Автореферат диссертации на соискание ученой степени д...»

«НЕГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ДОПОЛНИТЕЛЬНОГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ ИНСТИТУТ ПРОЕКТНОГО МЕНЕДЖМЕНТА" Сборник научных статей по итогам международной научно-пр...»

«Вісник № 2 (50), т. 1 ЖНАЕУ 2015 УДК 631.415.2:631.416.7(477.41/42) П. П. Надточий1 д. с.-х. н. Ю. А. Белявский к. с.-х. н. Житомирский национальный агроэкологический университет Ф. А. Вышневский Житомирский филиал ГУ "Институт охраны почв Украины" О...»

«ABLV Emerging Markets Bond Fund краткий проспект фонда Открытый инвестиционный фонд Зарегистрирован в Латвии, в Комиссии рынка финансов и капитала: Дата регистрации фонда: 23.03.2007...»

«Лечение и профилактика УДК 619:616.995.1-085 ЭФФЕКТИВНОСТЬ АВЕРСЕКТА ПЛЮС ПРИ ЦЕСТОДОЗАХ И НЕМАТОДОЗАХ СОБАК И КОШЕК В.Б. ЯСТРЕБ доктор ветеринарных наук Т.С. НОВИК доктор биологических наук Всеро...»

«ПОЛЕВОЙ ОПРЕДЕЛИТЕЛЬ В. В. Ивановский Витебский областной экологический центр учащихся В. В. И В А Н О В С К И Й ПОЛЕВОЙ ОПРЕДЕЛИТЕЛЬ ХИЩНЫХ ПТИЦ БЕЛАРУСИ Учебно-методическое пособие Витебск 2002 г. П родаже не подлежит Ответственные за выпуск: В. Т. Бычкова, Р. К. Романова Художник JI. А. Павловская Ф ото на о...»

«Анализ расхождений диагнозов СМП О.В.Зайратьянц, МГМСУ им. А.И.Евдокимова Рубрики диагноза Приказ МЗ СССР № 4 от 03.01.1952 г., Приложение 7 Стандарты Росздравнадзора "Правила формулировки диагноза", 2006 Приказ Минздрава России № 354н от 06.06.2013 г. "О порядке проведения патологоанатомических вскрытий"1. Основн...»

«№ 2 2015 г. 14.00.00 медицинские науки (14.03.00 Медико-биологические науки) УДК 615.322:582.998.2 КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ КОМПОНЕНТОВ ЭФИРНЫХ МАСЕЛ АЗУЛЕНСОДЕРЖАЩИХ РАСТЕНИЙ А. Е. Пахомова, Ю. В. Пахомова, Н. Е.-Е. Ким, Е...»

«ISSN 1682-1637 БЮЛЛЕТЕНЬ БОТАНИЧЕСКОГО САДА САРАТОВСКОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО УНИВЕРСИТЕТА ВЫПУСК 9 Саратовский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского БЮЛЛЕТЕНЬ БОТАНИЧЕСКОГО САДА САРАТОВСКО...»

«ГУРОВ ИЛЬЯ АНАТОЛЬЕВИЧ ЖЕЛТОЗЕМЫ ДРЕВНИХ МОРСКИХ ТЕРРАС В РАЙОНЕ СОЧИ Специальность 03.02.13 АВТОРЕФЕРАТ Диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук МОСКВА Работа выполнена в Почвенном институте им. В.В. Докучаева РАСХН Научный руковод...»

«Технологический институт – филиал ФГБОУ ВПО "Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия "УТВЕРЖДАЮ" Директор института _Х.Х. Губейдуллин "04" октября 2011г. РАБОЧАЯ ПРОГРАММА ДИСЦИПЛИНЫ ЭКОЛОГИЯ Направление подготовки 080200.62 "Менеджмент" Профиль подготовки "Производственный менеджмент" Квалификация выпускника бакал...»

«Потерянные поколения Н. В. Клягин (Институт философии РАН) Lost generations N. V. Klyagin (Institute of Philosophy, Russian Academy of Sciences) Аннотация: История человечества состояла из эпох биологической неотении (и психологической зрелости) и акселерации (псих...»

«МАНИФЕСТ ПРОТИВ ТРУДА Группа "Кризис"1. Господство мертвого труда Труп правит обществом – труп мертвого труда. Все силы мира соединились для защиты его господства – папа римский и Всемирный банк, Тони Блэр и Йорг Хайдер, профсоюзы и предприниматели, немецкие экологи и французские социалисты. Все они знают только один лозунг:...»

«ПОЯСНИТЕЛЬНАЯ ЗАПИСКА К РАБОЧЕЙ ПРОГРАММЕ ПО ВНЕУРОЧНОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ В 5 КЛАССЕ ПО ТЕМЕ ПРИРОДА РОДНОГО КРАЯ При изучении биологии в школе возникает необходимость более близкого знакомства с природой родного края, современным его состоянием и влиянием человека на окружающую среду. В школьном возрасте учащиеся уже п...»

«ЛЕЧЕНИЕ НЕРВНЫХ И ПСИХИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ Терапия больных, страдающих головокружением и нарушением равновесия Д.м.н., проф. Л.Н. КОРНИЛОВА1, к.м.н., н.с. В.В. ТЕМНИКОВА1, к.т.н. И.А. НАУМОВ1, д...»

«Пирязев Константин Олегович ПЛОДОВИТОСТЬ, ПРОДУКТИВНОСТЬ И БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ПЧЕЛ КАРПАТСКОЙ ПОРОДЫ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ЯНТАРНОЙ КИСЛОТЫ 06.02.07 – разведение, селекция и генетика сельскохозяйственных животных АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Москва 2011 Работа выполнена в Федер...»

«Современная парадигма сексуальности: молчание о сексуальности Пырьянова O.A. О сексуальности много говорят, пишут и спорят, однако большинство попыток понять данный феномен не выходит за рамки сложившихся представлений. Сексуальность достаточно давно интересовала людей, но ее философское осмысление началось лишь в XIX веке, однако т...»

«космическое излучение, естественные радионуклиды, искусственные радионуклиды. Повреждающее действие радиации на растение: прямое и непрямое, или косвенное действие радиации. Явление гормезиса. Опосредованные радиационно-биохимические реакции в растениях. Основные этапы радиацио...»

«ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "ВОРОНЕЖСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПЕДАГОГИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ" Ю.В. Юров, А.И. Григорьев, А.Ю. Юров ПСИХОЛОГИЧЕСКАЯ КОРРЕКЦИЯ СТРЕССА И СТРЕССОВЫХ РАССТРОЙСТВ Практическое руководство для с...»

«Литература 1. Уромова И.П. "Агробиологическое и экологическое обоснование приемов возделывания картофеля, полученного методом апикальной меристемы, в условиях ВолгоВятского региона" автореферат на соискание ученой степ...»

«Паразиты растений УДК 632:595.132:633.6 ИНТЕГРИРОВАННАЯ ЗАЩИТА САХАРНОЙ СВЕКЛЫ ОТ СВЕКЛОВИЧНОЙ НЕМАТОДЫ А.Г. БАБИЧ кандидат сельскохозяйственных наук А.А. БАБИЧ кандидат биологических наук Национальный университет биоресурсов и природопользования Украины г. Киев, ул. Героев Обороны, 15, e-mail...»

«Рабочая программа дисциплины "Экологические Ф ТПУ 7.1-21/01 аспекты применения нанотехнологий" УТВЕРЖДАЮ Директор ИФВТ _ А.Н.Яковлев "" _ 2013 г. РАБОЧАЯ ПРОГРАММА ДИСЦИПЛИНЫ ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПРИМЕНЕНИЯ НАНОТЕХНОЛОГИЙ СПЕЦИАЛЬНОСТЬ ООП: 150100 Материаловедение и технологии материалов ПРОФИЛЬ ПОДГОТОВКИ: Наноструктурные матер...»

«Умные больше не нужны или к чему ведт реформа школьного образования? По ролику http://www.youtube.com/watch?v=YSXgpMVR9Y0 (пропущена идущая в начале нарезка фраз, которые встречаются далее в докладе, первые се...»








 
2017 www.doc.knigi-x.ru - «Бесплатная электронная библиотека - различные документы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.